一次性使用日用品凈化車間衛(wèi)生管理制度
前 言
本標(biāo)準(zhǔn)全文強(qiáng)制。
自1996年發(fā)布以來，GB15979-1995《一次性衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》明確了生產(chǎn)企業(yè)的衛(wèi)生要求和目標(biāo)，管理部門也有監(jiān)督檢測的依據(jù)，在促進(jìn)行業(yè)健康發(fā)展和提高衛(wèi)生水平方面發(fā)揮了積極作用。同時，隨著產(chǎn)品類型和材料的發(fā)展，該標(biāo)準(zhǔn)在某些地方需要改進(jìn)。因此，提出修訂本標(biāo)準(zhǔn)。
本標(biāo)準(zhǔn)自實(shí)施之日起取代GB1579-1995。
本標(biāo)準(zhǔn)附錄A至附錄G為標(biāo)準(zhǔn)附錄。
本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國衛(wèi)生部提出。
本標(biāo)準(zhǔn)負(fù)責(zé)起草單位：上海市疾病預(yù)防控制中心；起草單位：寶潔（中國）有限公司、強(qiáng)生（中國）有限公司。
本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：沈偉、盧敏、楊宏平、周密、潘希和、劉育京。
中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)
一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn) GB15979-2002
Hygienic standard for disposable sanitary products 代替GB15979-1995
1、范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范了一次性日用品設(shè)備和工作環(huán)境衛(wèi)生管理制度、消毒滅菌實(shí)際效果、微生物檢測評價規(guī)范及相應(yīng)檢測方法、原材料及商品生產(chǎn)、消毒滅菌、儲存、運(yùn)輸全過程衛(wèi)生要求和商品標(biāo)志規(guī)定。
在本規(guī)范中，一次性日用品是指：
本規(guī)范應(yīng)用于中國一次性日用品的生產(chǎn)、制造和銷售。企業(yè)或者本人也適用于經(jīng)銷商進(jìn)口一次性日用品的單位、企業(yè)或者本人。
2.引入規(guī)范。
下列規(guī)范中包含的法律規(guī)定，根據(jù)本規(guī)范的引入，構(gòu)成本規(guī)范的法律規(guī)定。本規(guī)范出版發(fā)行時，所顯示的版本號合理。所有規(guī)范均已修訂，應(yīng)用本規(guī)范的個人應(yīng)討論應(yīng)用以下規(guī)范的最新概率。
GB15981-1995消毒滅菌實(shí)際效果評價方法及規(guī)范。
3.界定
本規(guī)范采用以下定義。
一次性使用日用品。
應(yīng)用一次后丟失。與身體同時或間接接觸的各種日常必需品，用于實(shí)現(xiàn)人體系統(tǒng)的環(huán)境衛(wèi)生或衛(wèi)生防疫(抑菌或抗菌)目的。商品的特點(diǎn)可以是固態(tài)的，也可以是液態(tài)的。比如一次性使用膠手套或護(hù)指(含衛(wèi)生護(hù)墊)、尿布等糞便用品(不含走穩(wěn)紙巾等衛(wèi)生間拿紙)、避孕套等。，在本規(guī)范中統(tǒng)稱為日用品。
4.商品食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。
4.1外觀一定要干凈整潔，符合日用品的原有特點(diǎn)，不能有異常氣味和臟東西。
4.2不能對皮膚和粘膜造成異常刺激和人民反應(yīng)及其危害。
4.3商品必須符合表1中分子生物學(xué)指標(biāo)值。
表1
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產(chǎn)品種類
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微生物指標(biāo)
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初始污染菌1)
cfu/g
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細(xì)菌菌落總數(shù)cfu/g或cfu/mL
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大腸菌群
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致病性化膿菌2）
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真菌菌落總數(shù)cfu/g或cfu/mL
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手套或指套、紙巾、濕巾、內(nèi)褲、電話膜
抗菌（或抑菌）液體產(chǎn)品
衛(wèi)生濕巾
口罩
普通級
消毒級
婦女經(jīng)期衛(wèi)生用品
普通級
消毒級
尿布等排泄物衛(wèi)生用品
普通級
消毒級
避孕套
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≤10000
≤10000
≤10000
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≤200
≤200
≤20
≤200
≤20
≤200
≤20
≤200
≤20
≤20
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不得檢出
不得檢出
不得檢出
不得檢出
不得檢出
不得檢出
不得檢出
不得檢出
不得檢出
不得檢出
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不得檢出
不得檢出
不得檢出
不得檢出
不得檢出
不得檢出
不得檢出
不得檢出
不得檢出
不得檢出
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≤100
≤100
不得檢出
≤100
不得檢出
≤100
不得檢出
≤100
不得檢出
不得檢出
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1）如初識污染菌超過表內(nèi)數(shù)值，應(yīng)相應(yīng)提高殺滅指數(shù)使達(dá)到本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的細(xì)菌與真菌限值。
2）致病性化膿菌指綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌與溶血性鏈球菌。
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4.4衛(wèi)生濕巾除了必須符合表1中的微生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)外，大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的殺滅率必須≥90%。如果需要注明對真菌的影響，白色念珠菌的殺滅率必須≥90%，其殺菌效果必須在室溫下保持至少一年。
4.5除大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌率必須≥50%（溶出性）或>26%（非溶出性）外，大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌率必須達(dá)到表1中同類產(chǎn)品的微生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)。如果需要注明對真菌的作用，白色念珠菌的抑菌率必須≥50%（溶出性）或>26%（非溶出性），其抑菌作用必須在室溫下保持至少一年。
4.6任何經(jīng)環(huán)氧乙烷消毒的衛(wèi)生用品出廠時，環(huán)氧乙烷殘留量必須≤250ug/g。
5.生產(chǎn)環(huán)境衛(wèi)生指標(biāo)。
5.1裝配包裝車間空氣中細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)≤2500cfu/m3。
5.2工作臺表面細(xì)菌落總數(shù)應(yīng)≤20cfu/cm2。
5.3工人手表面細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)≤300cfu/只手，無致病菌檢測。
6.生物監(jiān)測評價消毒效果。
6.1環(huán)氧乙烷消毒:殺滅枯草桿菌黑色變種芽胞(ATCC9372)≥103.
6.2電離輻射消毒:短小桿菌芽胞E6d(ATCC27142)的殺滅指數(shù)應(yīng)≥103.
6.3壓力蒸汽消毒:嗜熱脂肪桿菌(ATCC7953)的殺滅指數(shù)應(yīng)≥103.
7.測試方法。
7.1產(chǎn)品測試方法。
7.1.1產(chǎn)品外觀：目測應(yīng)符合本標(biāo)準(zhǔn)3.1的規(guī)定。
7.1.2產(chǎn)品毒理學(xué)測試方法：見附錄A。
7.1.3產(chǎn)品微生物檢測方法：見附錄B。
7.1.4產(chǎn)品殺菌性能.抗菌性能及穩(wěn)定性測試方法：見附錄C。
7.1.5產(chǎn)品環(huán)氧乙烷殘留測試方法：見附錄D。
7.2生產(chǎn)環(huán)境采樣及測試方法：見附錄E。
7.3生物監(jiān)測評價方法：見附錄F。
8.原材料衛(wèi)生要求。
8.1原材料應(yīng)無毒、無害、無污染；原材料包裝應(yīng)清潔，并明確說明內(nèi)容的名稱。生產(chǎn)單位、生產(chǎn)日期或生產(chǎn)批號；影響衛(wèi)生治療的原材料不得暴露；有特殊要求的原材料應(yīng)標(biāo)明保存條件和保質(zhì)期。
8.2對影響產(chǎn)品衛(wèi)生質(zhì)量的原材料應(yīng)有相應(yīng)的檢驗報告或證明材料，必要時應(yīng)進(jìn)行微生物監(jiān)測，并采取相應(yīng)的措施。
8.3禁止使用廢棄的衛(wèi)生用品作為原料或半成品。
9生產(chǎn)環(huán)境及工藝衛(wèi)生要求。
9.1生產(chǎn)區(qū)周邊環(huán)境應(yīng)整潔，無垃圾、蚊蠅等害蟲滋生地。
9.2生產(chǎn)區(qū)域應(yīng)有足夠的空間來滿足生產(chǎn)需要，布局必須滿足生產(chǎn)過程的要求，合理的分割、人員和物體的轉(zhuǎn)移，在產(chǎn)品過程中沒有逆向和交叉點(diǎn)。應(yīng)采取防污染措施和嚴(yán)格的操作程序，減少生產(chǎn)環(huán)境中的微生物污染。
9.3生產(chǎn)區(qū)應(yīng)配備有效的防塵、防蟲、防鼠措施、地面、墻壁、工作臺面應(yīng)平整、光滑、無灰塵。易于除塵、清潔和消毒，并采取足夠的照明和空氣消毒或凈化措施，以確保生產(chǎn)環(huán)境符合本標(biāo)準(zhǔn)第五章的規(guī)定。
9.4配備必要的生產(chǎn)質(zhì)檢設(shè)備，有完整的生產(chǎn)質(zhì)檢記錄，有效保證產(chǎn)品衛(wèi)生質(zhì)量。
9.5生產(chǎn)過程中使用易燃易爆物品或產(chǎn)生有害物質(zhì)的，必須采取相應(yīng)的安全防護(hù)措施，符合國家有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)或規(guī)定。
9.6原材料和成品應(yīng)分開堆放，待檢驗合格。不合格的原材料和成品應(yīng)嚴(yán)格分開堆放，并設(shè)置明顯標(biāo)志。倉庫應(yīng)干燥、清潔、通風(fēng)、防蟲、防鼠設(shè)施和墊板，以滿足產(chǎn)品儲存條件。
9.7進(jìn)入生產(chǎn)區(qū)時，應(yīng)更換工作服和工作鞋，戴工作帽。直接接觸裸體產(chǎn)品的人員應(yīng)戴口罩、手或手套進(jìn)行清潔消毒；生產(chǎn)區(qū)前應(yīng)設(shè)置更衣室、洗手池、消毒池和緩沖區(qū)。
9.8從事衛(wèi)生用品生產(chǎn)的人員應(yīng)保持個人衛(wèi)生，不得留指甲，工作時不得戴珠寶，長發(fā)應(yīng)卷在工作帽上。痢疾、傷寒、病毒性肝炎、活動性肺結(jié)核、尖銳濕疣、淋病、化膿性或滲出性皮膚病患者或醫(yī)院攜帶者不得直接參與產(chǎn)品接觸的生產(chǎn)活動。
9.9從事衛(wèi)生用品生產(chǎn)的人員應(yīng)在上崗前定期（每年一次）進(jìn)行健康檢查和衛(wèi)生知識培訓(xùn)（包括生產(chǎn)衛(wèi)生、個人衛(wèi)生、相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范），合格者方可上崗。
10.消毒過程要求。
10.1消毒產(chǎn)品的最終消毒必須采用環(huán)氧乙烷、電離輻射或壓力蒸汽等有效消毒方法。所使用的消毒設(shè)備必須符合相關(guān)的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。
10.2根據(jù)產(chǎn)品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)制定消毒程序。技術(shù)參數(shù).工作制度，經(jīng)驗證后嚴(yán)格按照既定的消毒工藝操作。消毒程序。影響消毒效果的技術(shù)參數(shù)或原材料或生產(chǎn)工藝變更后，應(yīng)重新驗證確定消毒過程。
10.3每每個消毒過程中，必須監(jiān)測相應(yīng)的工藝（物理）和化學(xué)指示器。每月使用相應(yīng)的生物指示器進(jìn)行監(jiān)測。只有當(dāng)工藝監(jiān)測、化學(xué)監(jiān)測和生物監(jiān)測符合規(guī)定要求時，消毒物品才能出廠。
10.4產(chǎn)品消毒后，外觀和性能應(yīng)與消毒前無明顯差異。
11.包裝、運(yùn)輸和儲存要求。
運(yùn)輸或儲存衛(wèi)生用品的單位或個人，應(yīng)嚴(yán)格按照生產(chǎn)者提供的運(yùn)輸和儲存要求進(jìn)行運(yùn)輸或儲存。直接接觸產(chǎn)品的包裝材料必須無毒、無害、清潔，產(chǎn)品的所有包裝材料必須具有足夠的密封性和牢固性，以確保產(chǎn)品在正常運(yùn)輸和儲存條件下不受污染。
12.產(chǎn)品標(biāo)識要求。
12.1產(chǎn)品標(biāo)識應(yīng)符合《中華人民共和國產(chǎn)品質(zhì)量法》的規(guī)定，并在產(chǎn)品包裝上標(biāo)明衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)號、生產(chǎn)日期、保質(zhì)期（有效期）或生產(chǎn)批號和限定使用日期。
12.2消毒產(chǎn)品還應(yīng)在銷售包裝上注明消毒、消毒日期、有效期、消毒批號和限定使用日期，并在運(yùn)輸包裝上注明消毒、消毒單位和地址。消毒方法。消毒日期、有效期、消毒批號和限定使用日期。
附錄 A
（標(biāo)準(zhǔn)的附錄）
產(chǎn)品毒理學(xué)測試方法
A1 各類產(chǎn)品毒理學(xué)測試指標(biāo)
當(dāng)原材料、生產(chǎn)工藝等發(fā)生變化可能影響產(chǎn)品毒性時，應(yīng)按表A1根據(jù)不同產(chǎn)品種類提供有效的（經(jīng)政府認(rèn)定的第三方）成品毒力學(xué)測試報告。
表A1
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產(chǎn)品種類
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皮膚刺激試驗
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陰道粘膜刺激試驗
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皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗
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手套或指套、內(nèi)褲
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√
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√
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抗菌（或抑菌）液體產(chǎn)品
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√
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根據(jù)用途選擇1）
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√
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濕巾、衛(wèi)生濕巾
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√
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根據(jù)用途選擇1）
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根據(jù)材料選擇
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口罩
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√
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婦女經(jīng)期衛(wèi)生用品
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√
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√
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尿布等排泄物衛(wèi)生用品
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√
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√
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避孕套
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√
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√
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1）用于引導(dǎo)粘膜的產(chǎn)品須做引導(dǎo)粘膜刺激試驗，但無須做皮膚刺激試驗。
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A2 試驗方法
皮膚刺激試驗。根據(jù)衛(wèi)生部《消毒技術(shù)規(guī)范》（第三版）第一卷《實(shí)驗技術(shù)規(guī)范》（1999）中消毒劑毒理學(xué)實(shí)驗技術(shù)中相應(yīng)的試驗方法，引導(dǎo)粘膜刺激試驗和皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗方法。
A3采用固體產(chǎn)品樣品制備方法。
注
1.皮膚刺激試驗中使用的空白對為：生理鹽水和斑貼紙。
2.在皮膚變態(tài)反應(yīng)中，用于致敏和刺激治療的劑量保持一致。
A3樣品制備。
A3.1皮膚刺激試驗和皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗。
橫斷切割一貼大小的產(chǎn)品。對于尿布等干性產(chǎn)品，女性月經(jīng)衛(wèi)生用品，用生理鹽水潤濕，貼在皮膚上，然后用斑貼紙覆蓋。
A3.2引導(dǎo)粘膜刺激試驗。
A3.2.1干產(chǎn)品(如女性經(jīng)期衛(wèi)生用品)
將足夠的產(chǎn)品水平切割，按1g/10ml的比例加入滅菌生理鹽水，密封在提取容器中，攪拌后放置在37℃±1℃下24小時。冷卻到室溫，攪拌后分析樣液，以備檢查。
A3.2.2濕產(chǎn)品(如衛(wèi)生濕巾)
陰道粘膜刺激試驗當(dāng)天，將濕巾中的添加劑擠出作樣品。
A4判斷標(biāo)準(zhǔn)。
以衛(wèi)生部《消毒技術(shù)規(guī)范》(第三版)第一卷《試驗技術(shù)規(guī)范》(1999)中毒理學(xué)試驗結(jié)果最終判斷的相應(yīng)部分作為試驗結(jié)果判斷原則。
附錄B
（標(biāo)準(zhǔn)的附錄）
產(chǎn)品微生物檢測方法
B1產(chǎn)品采集及樣品處理。
在同一批號的三個運(yùn)輸包裝中，至少提取12個最小銷售包裝樣品，1/4樣品用于檢測，1/4樣品用于保留樣品，1/2樣品(可就地封存)必要時用于復(fù)檢。抽樣的最小銷售包裝不得破裂，檢驗前不得打開。
在100級凈化條件下，用無菌方法打開至少3個用于檢測的包裝，從每個包裝中取樣，準(zhǔn)確稱10g±1g樣品。切割后加入200ml殺菌生理鹽水，充分混合，得到生理鹽水樣液。液體產(chǎn)品直接用原液制成樣液。
如果被檢樣品含有大量的吸水樹脂材料，導(dǎo)致不能吸出足夠的樣液，稀釋液的量可以每次增加50毫升，直到足夠的試驗樣液被吸出。在計算細(xì)菌菌落總數(shù)和真菌菌落總數(shù)時，調(diào)整稀釋度。
B2細(xì)菌菌落總數(shù)及初始污染菌檢測方法。
本方法適用于檢測產(chǎn)品初始污染菌和細(xì)菌菌落總數(shù)（以下簡稱細(xì)菌菌落總數(shù)）。
B2.1操作步驟。
上述生理鹽水樣液自然沉降后，取清液進(jìn)行菌落計數(shù)。共接種5個平盤，每個平盤加入1ml樣液，然后將冷卻至45℃左右的融化營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基15-20ml倒入每個平盤中，攪拌均勻。瓊脂凝固后，將平盤翻轉(zhuǎn)35℃±2℃48小時，計算平板上的菌落數(shù)。
B2.2結(jié)果報告。
不宜使用菌落片狀生長的平板電腦；根據(jù)類型（B1）計算符合要求的平板電腦上的菌落：
類型：X1-細(xì)菌菌落總數(shù)，cfu/g或cfu/ml；
A-5塊瓊脂培養(yǎng)基本版細(xì)菌菌落總數(shù)；
K-稀釋度。
當(dāng)菌落數(shù)在100以內(nèi)時，根據(jù)實(shí)數(shù)報告，超過100時才有兩位有效數(shù)。
樣品菌落總數(shù)超過本標(biāo)準(zhǔn)的，按B2.3進(jìn)行復(fù)檢和結(jié)果報告。
B2.3復(fù)檢方法。
保留的復(fù)檢樣品依照前法復(fù)檢兩次，兩次結(jié)果平均值符合本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的，確定被檢樣品合格；一次結(jié)果平均值超過本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的，判定被檢樣品不合格。
B3大腸菌群檢測方法。
B3.1操作步驟。
取樣液為5ml，接種50ml乳糖膽鹽發(fā)酵管，35℃±2℃培養(yǎng)24h。如果沒有酸或氣，則報告為大腸菌群陰性。
如果產(chǎn)生酸性氣體，則標(biāo)記伊紅美藍(lán)瓊脂平板電腦，在35℃±2℃培養(yǎng)18-24小時，觀察平板電腦上的菌落形態(tài)。典型的大腸菌落為黑紫色或紅紫色，圓形，邊緣整齊，表面光滑濕潤，常有金屬光澤，有些為紫黑色，無金屬光澤，或粉紅色，中心較深的菌落。
取1-2個疑似菌落進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢，同時接種乳糖發(fā)酵管，35℃±2℃培養(yǎng)24小時，觀察產(chǎn)氣情況。
B3.2結(jié)果報告。
所有乳糖膽鹽發(fā)酵管產(chǎn)生酸氣，乳糖發(fā)酵管產(chǎn)生酸氣，伊紅美藍(lán)平板上有典型的大腸菌落，革蘭氏染色為陰性無芽孢桿菌，可報告檢測樣品檢測大腸桿菌。
B4綠膿桿菌檢測方法。
B4.1操作步驟。
取樣液為5ml，加入50mlscdlp培養(yǎng)液，充分混合，35℃±2℃培養(yǎng)18-24小時。如果綠膿桿菌生長，培養(yǎng)液表面有一層細(xì)菌膜，培養(yǎng)液通常為黃綠色或藍(lán)綠色。從培養(yǎng)液的細(xì)菌膜中挑選培養(yǎng)物，接種十六烷三甲基溴化銨瓊脂平板，35℃±2℃培養(yǎng)18-24小時，觀察菌落特征。綠膿桿菌在培養(yǎng)基上生長良好，菌落扁平，邊緣不整齊，菌落周圍培養(yǎng)基略粉紅色，其他細(xì)菌不長。
革蘭氏染色采用可疑菌落涂片，革蘭氏陰性菌應(yīng)進(jìn)行以下試驗。
氧化酶試驗:取一小塊干凈的白色濾紙放入滅菌平皿中，用無菌玻璃棒挑選可疑菌落涂抹在濾紙上，然后滴一滴新制備的1%二甲基對苯二胺試液，30秒內(nèi)出現(xiàn)粉紅色或紫紅色，氧化酶試驗呈陽性，不變色者呈陰性。
綠膿菌素試驗：取2-3個可疑菌落，用培養(yǎng)基斜面接種綠膿菌素測定，35℃±2℃培養(yǎng)24小時，加入3-5ml三氯甲烷，充分振蕩，溶解培養(yǎng)物中可能存在的綠膿菌素。當(dāng)三氯甲烷呈藍(lán)色時，用吸管移動到另一個試管中，加入1mol/l鹽酸1ml，振蕩后靜置片刻。如果上層有粉紅色或紫紅色，則為陽性，表示有綠膿菌素。
附錄C
（標(biāo)準(zhǔn)的附錄）
產(chǎn)品殺菌性能、抑菌性能與穩(wěn)定性測試方法
C1樣品采集。
為了使樣品具有良好的代表性，應(yīng)在同一批三個運(yùn)輸包裝中隨機(jī)抽取至少20個銷售包裝樣品，其中5個樣品，5個進(jìn)行抗菌或殺菌性能測試，10個進(jìn)行穩(wěn)定性測試。
C2實(shí)驗菌和菌液制備。
C2.1試驗菌。
C2.1.1細(xì)菌：金黃色葡萄球菌（ATCC6538），大腸桿菌（8099或ATCC25922）。
C2.1.2酵母：白色念珠菌（ATCC10231）
菌液制備:取第3-14代營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基斜面新鮮培養(yǎng)物(18-24h)，用5ml0.03mol/L磷酸鹽緩沖液(以下簡稱PBS)洗去菌苔，用上述PBS稀釋至所需濃度。
C3殺菌性能試驗方法。
根據(jù)被試產(chǎn)品生產(chǎn)者的說明確定試驗取樣部位。
C3.1中和劑鑒定試驗。
殺菌性能試驗必須通過以下中和劑鑒定試驗。
C3.1.1試驗分組。
1)5mLPBS染菌樣品。
2)染菌樣片5ml中和劑。
3)染菌對照片5ml中和劑。
4)5ml中和劑染菌對照片。
5)染菌對照片5mLPBS。
6)同批PBS。
7)同批次中和劑。
8)同批次培養(yǎng)基。
C3.1.2評價規(guī)定。
1)第一組無試驗菌，或只有少數(shù)試驗菌落生長。
2)第二組比第一組多，但比第3.4.5組少，符合要求。
3)第3.4.5組有相似量的試驗菌生長，在1*104-9*104cfu/片之間，其組間菌落數(shù)誤差率不應(yīng)超過15%。
4)第6-8組無菌生長。
5)連續(xù)三次試驗取得合格評價。
C3.2殺菌試驗。
C3.2.1操作步驟。
用PBS沖洗試驗菌24h斜面培養(yǎng)物，制成菌懸液(所需濃度為:將100ul滴在對照樣品上，回收菌數(shù)為1*104-9*104cfu/片)。
取樣（2.0cm*3.0cm）和對照樣（與樣品同質(zhì)，尺寸相同，但不含抗菌材料，經(jīng)滅菌處理），分為4組，放置在4個滅菌平板中。
取上述細(xì)菌懸浮液，分別在每張樣品和對照樣品上滴100ul，均勻涂抹，開始計時，作用2.5.10.20min，用無菌鑷子將樣品放入含有5ml相應(yīng)中和劑的試管中，充分混合，適當(dāng)稀釋，然后取2-3個稀釋度，分別吸收0.5ml，放置在兩個平坦的容器中，冷卻至40-45℃的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（細(xì)菌）或沙瓊脂培養(yǎng)基（酵母）15ml，轉(zhuǎn)動平坦容器，使其完全均勻，瓊脂凝固后轉(zhuǎn)動平板，35℃±2℃培養(yǎng)48h（細(xì)菌）或72h（酵母），進(jìn)行活菌菌落計數(shù)。
實(shí)驗重復(fù)三次，按類型(C1)計算殺菌率:
(A-B)/A*100%(C1)
公式：X3-殺菌率，%；
A-對照樣品的平均菌落數(shù)；
B-使樣品平均菌落數(shù)。
C3.2.2評價標(biāo)準(zhǔn)。
產(chǎn)品具有殺菌作用。
C4溶出性抗(抑)菌產(chǎn)品抗菌性能試驗方法。
C4.1操作步驟。
用PBS沖洗試驗菌24h斜面培養(yǎng)物，制成菌懸液（所需濃度為：將100ul滴入對照樣品或5ml樣液中，回收菌數(shù)為1*104-9*104cfu/片或ml）。
取樣品（2.0cm*3.0cm）或樣品（5ml）和對照樣品或樣品（尺寸相同，但不含抗菌材料，經(jīng)滅菌處理）。
取上述細(xì)菌懸浮液，分別在每個試樣或樣液和對照樣品或樣液上或內(nèi)滴100ul，均勻涂抹/混合，開始計時，作用2.5.10.20min，用無菌鑷子將樣品或樣液(0.5ml)放入含5mlPBS的試管中，充分混合，適當(dāng)稀釋，然后取2-3個稀釋度，分別吸收0.5ml，放入兩個平皿中，用冷至40-45℃的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(細(xì)菌)或沙氏瓊脂培養(yǎng)基(酵母)15ml傾注，轉(zhuǎn)動平皿，使其充分均勻，瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平板，35℃±2℃培養(yǎng)48h(細(xì)菌)或72h(酵母)，做活菌菌落計數(shù)。
實(shí)驗重復(fù)三次，按型(C2)計算抑菌率。
(A-B)/A*100(C2)
公式：X4-抑菌率，%；
A-對照樣品的平均菌落數(shù)；
B-被試樣品的平均菌落數(shù)。
C4.2評價標(biāo)準(zhǔn)。
產(chǎn)品具有抑菌作用，抑菌率≥90%，產(chǎn)品具有較強(qiáng)的抑菌作用。
C5非溶出性抗抑）菌產(chǎn)品抗菌性能試驗方法。
C5.1操作步驟。
0.75g分裝包試樣片（切成1.0cm*1.0cm大?。?。
將0.75g重樣放入250ml三角燒瓶中，分別加入70mlPBS和5ml菌懸液，使菌懸液在PBS中的濃度為1*104-9*104cfu/ml。
將三角燒瓶固定在振蕩搖床上，用300r/min振蕩1h。
取0.5ml搖動樣液，或用PBS稀釋樣液，用瓊脂傾注法接種平皿，進(jìn)行菌落計數(shù)。
同時，設(shè)置對照樣品組和無樣品組。對照樣品組的對照樣品大小與被試樣品相同，但不含抗菌成分。其他操作程序與被試樣品組相同。無樣品組，取5ml菌懸液和70mlPBS，加入250ml三角燒瓶，混合均勻，分別在0時間和振蕩1小時后，取0.5ml菌懸液和PBS混合進(jìn)行適當(dāng)稀釋，然后進(jìn)行菌落計數(shù)。
抑菌率按類型(C3)計算：
(A)
公式：X5-抑菌率，%；
A-被試樣品振蕩前的平均菌落數(shù)；
B-被試樣品振蕩后的平均菌落數(shù)。
C5.2評價標(biāo)準(zhǔn)。
C6穩(wěn)定性測試方法。
C6.1測試條件。
C6.1.1自然留樣：原包裝樣品在室溫下至少1年，每半年進(jìn)行抑菌或殺菌性能測試。
C6.1.2加速試驗:將原包裝樣品放入54-57℃恒溫箱14天或37-40℃恒溫箱3個月，保持相對濕度>75%，進(jìn)行抑菌或殺菌性能試驗。
C6.2評價標(biāo)準(zhǔn)。
產(chǎn)品自然留樣后，其殺菌率或抑菌率達(dá)到附錄C3或附錄C4。附錄C5中規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)值，產(chǎn)品在室溫下的殺菌或抑菌保持時間為自然留樣時間。
經(jīng)過54℃加速試驗，產(chǎn)品的殺菌率或抑菌率達(dá)到附錄C3或附錄C4中規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)值，產(chǎn)品的殺菌或抑菌效果在室溫下至少保持一年。
經(jīng)37℃加速試驗，產(chǎn)品的殺菌率或抑菌率達(dá)到附錄C3或附錄C4中規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)值，產(chǎn)品的殺菌或抑菌效果在室溫下至少保持兩年。
附錄D
（標(biāo)準(zhǔn)的附錄）
產(chǎn)品環(huán)氧乙烷殘留量測試方法
D1測試目的。
確定產(chǎn)品消毒后的使用時間。當(dāng)新產(chǎn)品或原材料的變化可能影響產(chǎn)品的理化性能時，應(yīng)進(jìn)行測試。
D2樣品采集。
環(huán)氧乙烷消毒后，立即從統(tǒng)一消毒批號的三個大包裝中隨機(jī)抽取一定量的小包裝樣品。取樣量至少應(yīng)滿足規(guī)定的測量次數(shù)（必要時留一定量進(jìn)行復(fù)測）。
環(huán)氧乙烷消毒后24小時及以后每隔幾天測量殘留量，直至殘留量降至本標(biāo)準(zhǔn)4.6規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)值以下。
D3儀器及操作條件。
儀器:氣相色譜儀、氫焰檢測器(FID)
柱：Chorosorb101HP60-80目；玻璃柱長2m，φ3nm。柱溫：120℃。
探測器：150℃。
氣化器：150℃。
載氣量：氮?dú)猓?5ml/min。
氫氣：35ml/min。
空氣：350ml/min。
柱前壓約為108kPa。
D4.1標(biāo)準(zhǔn)配制。
用100毫升玻璃注射器從純環(huán)氧乙烷小瓶中提取環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)氣體（反復(fù)排空二次，排除原空氣），塞上橡膠頭，用10毫升注射器提取述100毫升注射器中提取10毫升純環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)氣體，用氮?dú)庀♂屩?00毫升（10毫升標(biāo)準(zhǔn)氣體可注入90毫升氮?dú)鈳鹉z塞頭的注射器）。用同樣的方法稀釋2-3次（稀釋1000-10000倍），作為三種濃度的標(biāo)準(zhǔn)氣體。根據(jù)環(huán)氧乙烷小瓶中環(huán)氧乙烷的純度、稀釋倍數(shù)和室溫計算最終標(biāo)準(zhǔn)氣體中的環(huán)氧乙烷濃度。
計算公式如下：
公式：C-標(biāo)準(zhǔn)氣體濃度，ug/ml；
k-稀釋倍數(shù)；
T-室溫，℃。
D4.2樣品處理。
至少取2個最小包裝產(chǎn)品，切碎，隨機(jī)準(zhǔn)確稱2g，放入提取容器中，加入5ml去離子水，充分搖勻，放置4小時或振蕩30min備用。如果被檢樣品為吸水樹脂材料產(chǎn)品，部門應(yīng)適當(dāng)增加去離子水量，以確保至少能吸收2ml樣品。
D4.3分析。
儀器穩(wěn)定后，在同等條件下，環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)氣體進(jìn)樣1.0ml，分析樣品（水溶液）進(jìn)樣2ul，每種液體平行測量兩次。
根據(jù)保留時間定性，根據(jù)峰面積(或峰高)進(jìn)行定量計算，取平均值。
D4.4計算。
環(huán)氧乙烷工作曲線采用進(jìn)入環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)氣體的微克(ug)數(shù)。
根據(jù)樣品中環(huán)氧乙烷對應(yīng)的峰面積(或峰高)，在工作曲線上獲得環(huán)氧乙烷的量A(ug)，并以類型(D2)獲得產(chǎn)品中環(huán)氧乙烷的殘留量。
公式：X-產(chǎn)品環(huán)氧乙烷殘留，ug/g；
A-從工作曲線中檢測到的環(huán)氧乙烷量，ug；
M-所取樣品量，g；
V(萃)-萃取液體積，ml；
V(進(jìn))-進(jìn)樣量，ml。
附錄E
（標(biāo)準(zhǔn)的附錄）
生產(chǎn)環(huán)境采樣與測試方法
E1空氣采樣及試驗方法。
E1.1樣品采集。
動態(tài)進(jìn)行。
室內(nèi)面積不超過30m2，內(nèi)外三點(diǎn)，內(nèi)外點(diǎn)距墻1m；室內(nèi)面積超過30m2，東、西、南、北、中5點(diǎn)，周圍4點(diǎn)距墻1m。
取樣時，將含有營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的平板(直徑9cm)放置取樣點(diǎn)(約桌面高度)，打開平板蓋，使平板在空氣中暴露5min。
E1.2細(xì)菌培養(yǎng)。
取樣前，將準(zhǔn)備好的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基35℃±2℃培養(yǎng)24h，取出檢查是否有污染，將污染培養(yǎng)基去除。
將采集的培養(yǎng)基在6h內(nèi)送到實(shí)驗室，在35℃±2℃培養(yǎng)48h觀察結(jié)果，計算平板上的細(xì)菌落數(shù)。
E1.3菌落計算。
類型：y1-空氣中細(xì)菌菌落總數(shù)，cfu/m3；
A-平板上平均細(xì)菌菌落數(shù)；
S1-平板面積，cm2；
t-暴露時間，min。
E2工作臺表面和工人手表面采樣測試方法。
E2.1樣品采集。
工作臺：將滅菌內(nèi)徑為5cm*5cm的滅菌規(guī)格板放在被檢物體表面，用浸泡在滅菌生理鹽水中的棉簽涂抹10次，然后接觸部分棉棒剪掉，將棉簽放入含有10ml滅菌生理鹽水的取樣管中進(jìn)行檢查。
E2.2細(xì)菌菌落總數(shù)檢測。
將收集的樣品在6小時內(nèi)送到實(shí)驗室。每根取樣管充分混合后，取1ml樣液，放入滅菌容器中，傾注營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。每個樣品平行接種兩個容器，35℃±2℃培養(yǎng)48小時觀察結(jié)果，計算平板上細(xì)菌的數(shù)量。
類型：y2-工作臺表面細(xì)菌菌落總數(shù)，cfu/cm2；
A-平板上平均細(xì)菌菌落數(shù)；
S2-采樣面積，cm2；
y3-工人手表面細(xì)菌菌落總數(shù)，cfu/手。
E2.3致病菌檢測。
消毒效果生物監(jiān)測評價方法。
F1環(huán)氧乙烷消毒。
F1.1環(huán)氧乙烷消毒效果評價用生物指示菌為枯草桿菌黑色變種芽胞(ATCC9372)。在菌量為5*105-5*106cfu/片，環(huán)氧乙烷濃度為600mg/L±30mg/L，作用溫度為54℃±2℃，相對濕度為60%±10%，其殺滅90%微生物所需時間D值為2.5-5.8min，存活時間≥7.5min，殺滅時間≤58min。
F1.2每次測試至少放置10個生物指示劑，放在最難殺死的地方。消毒后，取出指示菌片接種鷹眼肉湯培養(yǎng)液進(jìn)行定性檢測或接種營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行定量檢測，對未處理的陽性對照菌片進(jìn)行相同接種，均在35℃±2℃培養(yǎng)。陽性對照應(yīng)在24小時內(nèi)生長。如果定性培養(yǎng)樣品連續(xù)觀察7天無菌生長，可報告生物指示劑培養(yǎng)陰性，消毒合格。與陽性對照相比，定量培養(yǎng)樣品的滅活指數(shù)達(dá)到103，也可報告消毒合格。
F2電離輻射消毒。
F2.1電離輻射消毒效果評價用生物指示菌為短桿菌芽胞E601(ATCC27142)，當(dāng)菌量為5*105-5*106cfu/片時，殺滅90%微生物所需的D10值應(yīng)為1.7kgy。
F2.2每次測試至少選擇5箱，每箱產(chǎn)品放置3個生物指示劑，放置最小劑量。消毒后，取出指示菌片接種營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)液進(jìn)行定性檢測或接種營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行定量檢測，未處理陽性對照菌片進(jìn)行相同接種，均放置35℃±2℃。陽性對照應(yīng)在24小時內(nèi)生長。如果定性培養(yǎng)樣品連續(xù)觀察7天無菌生長，可報告生物指示劑培養(yǎng)陰性，消毒合格。與陽性對照相比，定量培養(yǎng)樣品滅活指數(shù)達(dá)到103，也可報告消毒合格。
F3壓力蒸汽消毒。
按照GB15981-1995的規(guī)定執(zhí)行。
附錄G
（標(biāo)準(zhǔn)的附錄）
培養(yǎng)基與實(shí)際制備
G1 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基
成分：
蛋白胨 10g
牛肉膏 3g
氯化鈉 5g
瓊脂 15g-20g
蒸餾水 1000mL
制法：除瓊脂外其他成分溶解于蒸餾水中，調(diào)pH至7.2-7.4，加入瓊脂，加熱溶解，分裝試管，121℃滅菌15min后備用。
G2 乳糖膽鹽發(fā)酵管
成分：
蛋白胨 20g
豬膽鹽（或牛、羊膽鹽） 5g
乳糖 10g
0.04%溴甲酚紫水溶液 25mL
蒸餾水 加至1000mL
制法：將蛋白胨、膽鹽及乳糖溶于水中，校正pH至7.4，加入指示劑，分裝沒管50mL，并放入一個小倒管，115℃滅菌15min，即得。
G3 乳糖發(fā)酵管
成分：
蛋白胨 20g
乳糖 10g
0.04%溴甲酚紫水溶液 25mL
蒸餾水 加至1000mL
制法：將蛋白胨及乳糖溶于水中，校正pH至7.4，加入指示劑，分裝每管10mL，并放入一個小倒管，115℃滅菌15min，即得。
G4 伊紅美藍(lán)瓊脂（EMB）
成分：
蛋白胨 10g
乳糖 10g
磷酸氫二鉀 2g
瓊脂 17g
2%伊紅Y溶液 20mL
0.65%美藍(lán)溶液 10mL
蒸餾水 加至1000mL
制法：將蛋白胨、磷酸鹽和瓊脂溶解于蒸餾水中，校正pH至7.1，分裝與燒瓶內(nèi)，121℃滅菌15min備用，臨用時加入乳糖并加熱溶化瓊脂，冷至55℃，加入伊紅和美藍(lán)溶液搖勻，傾注平板。
G5 SCDLP 液體培養(yǎng)基
成分：
酪蛋白胨 17 g
大豆蛋白胨 3 g
氯化鈉 5 g
磷酸氫二鉀 2.5 g
葡萄糖 2.5 g
卵磷脂 1 g
吐溫80 7 g
蒸餾水 1000 mL
制法：將各種成分混合(如無酪蛋白胨和大豆蛋白胨可用日本多胨代替)，加熱溶解，調(diào)pH至7.2～7.3，分裝，121℃滅菌20min，搖勻，避免吐溫80沉于底部，冷至25℃后使用。
G6 十六烷三甲基溴化銨培養(yǎng)基
成分：
牛肉膏 3 g
蛋白胨 10 g
氯化鈉 5 g
十六烷三甲基溴銨 0.3 g
瓊脂 20 g
蒸餾水 1000 mL
制法：除瓊脂外，上述各成分混合加熱溶解，調(diào)pH至7.4～7.6，然后加入瓊脂，115℃滅菌20 min，冷至55℃左右傾注平皿。
G7 綠膿菌素測定用培養(yǎng)基斜面
成分：
蛋白胨 20 g
氯化鎂 1.4 g
硫酸鉀 10 g
瓊脂 18 g
甘油(化學(xué)純) 10g
蒸餾水 加至1 000 mL
制法：將蛋白胨、氯化鎂和硫酸鉀加到蒸餾水中，加熱溶解，調(diào)pH至7.4，加入瓊脂和甘油，加熱溶解，分裝試管，115℃滅菌20 min，制成斜面?zhèn)溆?。G8 明膠培養(yǎng)基
成分：
牛肉膏 3 g
蛋白胨 5 g
明膠 120 g
蒸餾水 1 000 mL
制法：各成分加入蒸餾水中浸泡20 min，加熱攪拌溶解，調(diào)pH至7.4，5 mL分裝試管中，115℃ 滅菌20 min，直立制成高層備用。
G9 硝酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)基
成分：
蛋白胨 10 g
酵母浸膏 3 g
硝酸鉀 2 g
亞硝酸鈉 0.5 g
蒸餾水 1000 mL
制法：將蛋白胨與酵母浸膏加到蒸餾水中，加熱溶解，調(diào)pH至7.2，煮沸過濾后補(bǔ)足液量，加入硝酸鉀和亞硝酸鈉溶解均勻，分裝到有小倒管的試管中，115℃滅菌20 min備用。
G10 血瓊脂培養(yǎng)基
成分：
營養(yǎng)瓊脂 100 mL
脫纖維羊血(或兔血) 10 mL
制法：將滅菌后的營養(yǎng)瓊脂加熱溶化，涼至55℃左右，用無菌方法將10 mL脫纖維血加入后搖勻，傾注平皿置冰箱備用。
G11 甘露醇發(fā)酵培養(yǎng)基
成分：
蛋白胨 10 g
牛肉膏 5 g
氯化鈉 5 g
甘露醇 10 g
0.2％溴麝香草酚藍(lán)溶液 12 mL
蒸餾水 1000 mL
制法：將蛋白胨、氯化鈉、牛肉膏加到蒸餾水中，加熱溶解，調(diào)pH至7.4，加入甘露醇和溴麝香草酚藍(lán)混勻后，分裝試管，115℃滅菌20 min備用。
G12 葡萄糖肉湯
成分：
蛋白胨 10 g
牛肉膏 5 g
氯化鈉 5 g
葡萄糖 10 g
蒸餾水 1000 mL
制法：上述成分溶于蒸餾水中，調(diào)pH至7.2～7.4，加熱溶解，分裝試管，121℃滅菌15min后備用。
G13 兔血漿
制法：取滅菌3.8％檸檬酸鈉1份，兔全血4份，混勻靜置，3 000 r/min離心5 min，取上清，棄血球。
G14 沙氏瓊脂培養(yǎng)基
蛋白胨 10 g
葡萄糖 40g
瓊脂 20g
蒸餾水 1000 mL
用700 mL蒸餾水將瓊脂溶解，300 mL蒸餾水將葡萄糖與蛋白胨溶解，混合上述兩部分，搖勻后分裝，115℃滅菌15 min，即得。使用前，用過濾除菌方法加入0.1g/L的氯霉素或者0.03g/L的鏈霉素。
定性試驗采用沙氏培養(yǎng)液，即除不加瓊脂外其他成分與制法同上。
G15 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)液
蛋白胨 10 g
氯化鈉 5 g
牛肉膏 3 g
蒸餾水 1000 mL
調(diào)節(jié)pH使滅菌后為7.2～7.4，分裝，115℃滅菌30 min，即得。
G16 溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基
蛋白胨 10 g
葡萄糖 5g
蒸餾水 1000 mL
調(diào)節(jié)pH至7.0～7.2，加2％溴甲酚紫酒精溶液0.6 mL，115℃ 滅菌30 min，即得。
G17 革蘭氏染色液
結(jié)晶紫染色液：
結(jié)晶紫 1 g
95％乙醇 20 mL
1％草酸銨水溶液 80 mL
將結(jié)晶紫溶解于乙醇中，然后與草酸銨溶液混合。
革蘭氏碘液：
結(jié)晶紫 1 g
碘 1 g
碘化鉀 2 g
蒸餾水 300 mL
脫色劑
95％乙醇
復(fù)染液：
(1)沙黃復(fù)染液：
沙黃 0.25 g
95％乙醇 10 mL
蒸餾水 90 mL
將沙黃溶解于乙醇中，然后用蒸餾水稀釋。
(2)稀石炭酸復(fù)紅液
稱取堿性復(fù)紅10g，研細(xì)，加95％乙醇100mL，放置過夜，濾紙過濾。取該液10mL，加5％石炭酸水溶液90mL混合，即為石炭酸復(fù)紅液。再取此液10mL，加水90mL，即為稀石炭酸復(fù)紅液。
G18 0.03 mol/L磷酸鹽緩沖液（PBS，pH7.2）
成分：
磷酸氫二鈉 2.83 g
磷酸二氫鉀 1.36 g
蒸餾水 1000 mL
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